Protein A capture step (Non-MabSelect SuRe ™, PrismA or NGL)를 활용하는 downstream 공정을 위해, native 및 재조합 protein A 리간드 변이체를 포함한 잔여 Protein A를 정확하고 정밀하게 정량화하도록 설계되었으며, 이 키트는 단일클론 항체 정제를 위한 친화성 크로마토그래피에 사용되는 여러 Protein A 리간드 중 하나인 Repligen의 재조합 Protein A standard (rProtein A™)가 함께 제공됩니다.
Repligen의 Protein A ELISA 키트는 적절한 절차에 따라 천연 황색포도상구균 Protein A 및 기타 재조합 Protein A 형태를 포함한 다른 Protein A 변종을 정량화하는 데에도 사용할 수 있습니다.
Protein A ELISA kit는 치료용 단백질 제품에 존재하는 소량의 Protein A를 측정하는 신뢰할 수 있고 사용하기 쉬운 고감도의 분석법으로 다음과 같은 여러 개발 및 상업용 제조 단계에서 사용 가능합니다
Anti-protein A coated 96-well microtiter plate
Reagent A: sample diluent (5x)
Reagent B: recombinant protein A standard solution
Reagent C: rabbit anti-protein A: biotin probe
Reagent D: streptavidin: peroxidase conjugate
Reagent E: TMB peroxidase substrate
PBS packs (quantity 2)
이 키트에 제공된 polystyrene microtiter plate는 anti-Protein A antibodies로 코팅되어 있습니다.
rProtein A™ standard (Reagent B) 및 테스트 샘플은 샘플 희석액(Reagent A)과 함께 희석하여 immobilized 항체와 함께 인큐베이션합나다.
Captured rProtein A™ 리간드는 이후 Biotinylated anti-Protein A probe (Reagent C)를 추가하여 검출합니다. 이 probe는 높은 치환율을 가지고 있어 Streptavidin Peroxidase conjugate (Reagent D)의 최대 결합을 가능하게 합니다.
최종 검출 단계에서는 Tetramethylbenzidine, TMB (Reagent E)를 추가하여 매우 민감한 발색 반응을 일으킵니다. 발색 강도는 샘플에 존재하는 rProtein A™ 리간드 양에 비례합니다.